细胞核染料 Hoechst 33258

Hoechst 33258细胞核染料是一系列荧光染料，用于在荧光显微镜中标记DNA。它们也常用于可视化细胞核和线粒体的染色。科研中通常使用的两种分别为：Hoechst 33258和Hoechst 33342。 两种染料都被约350nm的紫外光激发，并且都发射蓝/青色荧光，发射最大值为461nm。 Hoechst染色剂可以与活细胞或固定细胞一起使用，并且通常用作另一种核酸染色剂DAPI的替代物。 它们之间的关键区别在于Hoechst 33342的额外乙基使其更具亲脂性，因此更容易穿过完整的细胞膜。在某些应用中，Hoechst 33258的渗透性明显低于Hoeschst 33342。这些染料也可用于通过绘制标准的发射 - 含量曲线来检测样品的DNA的含量。

染色细胞分析方案

        以下程序适用于大多数细胞类型。 生长培养基，细胞密度，细胞类型和其他因素可能影响染色。 玻璃器皿上的残留洗涤剂也可能影响许多生物染色，导致在没有细胞存在的溶液中出现明亮染色的物质。

        通过离心沉淀细胞并将细胞重悬于缓冲盐溶液或培养基中，经过测试染料的最佳结合pH为7.4。培养物中的贴壁细胞可以在盖玻片上或细胞培养孔中原位染色。Hoechst的染色浓度为0.5-5nM，并将其孵育15至60分钟。在最初的实验中，最好在整个建议范围内尝试几种染料浓度，以确定产生最佳染色的浓度。