蛋白酶荧光底物Gly-Pro-AMC

Gly-Pro-AMC是用于检测二肽酰多肽酶IV (DPPIV)的高灵敏度荧光底物，一种丝氨酸蛋白酶，能够从倒数第二位上是L-脯氨酸或者L-丙氨酸的多肽上剪切其N末端的二肽酰。DPPIV是表达于多种细胞（包括上皮细胞，内皮细胞和淋巴细胞）表面的多功能蛋白质。它与T细胞活化抗原CD26和腺嘌呤核苷脱氨基酶（腺苷脱氨酶）结合蛋白具有同一性，它以可溶性状态释放于血浆中。CD26/DPPIV的底物包括多种含有脯氨酸的多肽，例如生长因子、趋化因子、神经肽和血管活性肽。DPPIV参与免疫调控，信号转导和细胞凋亡，并且在肿瘤的发展中发挥重要作用。重要的是，DPPIV是II型糖尿病的治疗靶点，由于其作为血清蛋白酶，能够剪切多肽胰高血糖素家族中肠降血糖素荷尔蒙，以此调节体内葡糖糖的稳定。研究显示一种DPPIV抑制剂可以增强葡糖糖衰减的耐受力。用带有Gly-Pro-AMC的DPPIV检测是一种简单、快速，灵活的检测法，是理想的高通量筛选方法。与DPPIV检测法相比，这种检测法增强了检测灵敏度，使研究者可以用更少的酶，同时获得恰当的Z值。这种单一性的酶偶联形式使用非常方便，只需要在检测样品中添加一种单一的试剂；在20inm内可以获得最大感光值，并且其单一产物非常稳定。

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Gly-Pro-AMC：
在DMSO中制成10至25 mM的Gly-Pro-AMC储备溶液，避光。 注意：储备溶液应及时使用； 应将所有未使用的溶液等分，并在-20℃冷冻。注意：避免重复冻融循环，并避免光照。 

2.工作溶液

Gly-Pro-AMC：
取出一个小瓶，并用您选择的测定缓冲液（例如50 mM Tris-HCl，pH 7.5，1.0 mM DTT）稀释储备溶液，制成50至100 µM测定溶液。

样品操作及分析

1.将等体积的DPPIV标准品或样品与测定溶液混合，并在室温下孵育至少1小时。

2.在Ex / Em = 380/500 nm处监测荧光增加。