钙离子荧光探针腔肠素

钙测量对于许多生物学研究至关重要。水母发光蛋白复合物包含22kD的载水母发光蛋白，分子氧和发光体腔肠素。当三个Ca2 +离子与该配合物结合时，腔肠素被氧化为腔肠酰胺，并伴有二氧化碳和蓝光的释放。水母发光蛋白的生物发光对Ca2 +浓度的大约三次方依赖性，可以在〜0.1 µM至> 100 µM的宽检测范围内测量Ca2 +浓度。与荧光Ca2 +指示剂不同，可以检测Ca2 +结合的水母发光蛋白而无需照亮样品，从而消除了自发荧光的干扰。天然腔肠素及其衍生物赋予水母发光蛋白复合物不同的Ca2 +亲和力和光谱性质。据报道，用腔肠素hcp重组的重组载脂蛋白水泡蛋白总体上具有最佳的发光，同时具有高量子产率和快速响应时间。但是，腔肠素类似物在细胞内重建水母发光蛋白可能相对较慢。含有腔肠素的cp，f或h形式的水母发光蛋白显示的发光强度是用天然腔肠素重构的脱辅基水母发光蛋白的发光强度的10-20倍。腔肠素h和cp已用于GPCR的HTS筛选测定中。